Бимолекулалық флуоресценцияны толықтыру (BiFC) талдауы тірі жасушаны бейнелеу немесе бекітілген жасушалар арқылыақуыз-ақуыз әрекеттесуін in vivo тікелей визуализациялау үшін қолданылатын әдіс. … BiFC алғаш рет Ху және басқалары сипаттаған.
Бимолекулалық флуоресценцияны толықтыру қалай жұмыс істейді?
BiFC жұмыс принципі флуоресцентті протеиннің екі сегментінің фрагменттердегі ақуыз-ақуыз әрекеттесуіне байланысты жақын жерде болған кезде олардың бірігуі нәтижесінде флуоресцентті кешеннің дамуына негізделген, т.б., BiFC жүйесінде флюорофор амин және карбоксил терминалдарына бөлінеді.
BiFC сынағы дегеніміз не?
бимолекулалық флуоресценцияны толықтыру (BiFC) талдау тірі жасушалардағы ақуыз әрекеттесулерін қарапайым және тікелей визуализациялауға мүмкіндік береді (45). BiFC тәсілі флуоресцентті ақуыздың флуоресцентті емес фрагменттерімен біріктірілген екі ақуыз бір-бірімен әрекеттескенде флуоресцентті кешеннің түзілуіне негізделген (-сурет)
BiFC сынағы не үшін жасалады?
BiFC идеясы қызықтыратын ақуыздарыңызбен біріктірілген GFP жартысын экспрессиялау болып табылады Егер POI өзара әрекеттессе, функционалды GFP алу үшін екі жартыны біріктіруге болады. Сондықтан ұяшықта GFP жартысы болса, GFP антиденесінің оны анықтай алатынына таң қалмаймын.
BiFC қайтымды ма?
BiFC кешендерінің қайтымсыздығы жақсы құжатталған (10) және бәрі болмаса да, флуоресцентті протеин негізіндегі BiFC жүйелері қайтымсыз болып көрінеді (8, 33, 43, 48–51).