Қолдану кезінде (20-30 мин) мұзда сақталатын RIPA буферін 2-3 рет қатып, ерітуге болады. Мұздатылған буферді -80 градуста сақтаңыз.
RIPA буферін қанша уақыт сақтай аламын?
1. Буфер үздіксіз пайдаланылса, 10x буферді 1-2 апта бойы 4°C температурада ұстау ұсынылады. Ұзақ уақыт бойы буферді -20°C температурада сақтау керек. Көптеген кішігірім эксперименттер орындалатын болса, 10 есе буферді бөлу ұсынылады.
RIPA буферін сақтауға бола ма?
Дайындалған RIPA буферін бөліп алу және −20°C температурада сақтау керек. Бірден қолданар алдында еріген аликвота протеаза және/немесе фосфатаза тежегіштерін қосыңыз. Бір миллилитр буфер шамамен 5 миллион жасуша лизисі үшін жеткілікті. …
RIPA лизаттарын қалай сақтайсыз?
Дайын лизаттарды мүмкіндігінше тез пайдаланыңыз және мүмкіндігінше қысқа уақытқа сақтаңыз. Лизаттарды - 80℃ температурада мүмкіндігінше ұзақ сақтаңыз. Ұзақ мерзімді сақтауды қажет ететін лизаттар үшін тозудың алдын алу үшін жаңадан дайындалған түтіктерді қолжетімді -80℃ мұздатқышқа ауыстырыңыз.
RIPA буферін қалай ерітесіз?
Жасушалардан соңғы жуу ерітіндісін алып тастағаннан кейін жасуша түйіршіктеріне RIPA буферінің сәйкес көлемін (0,5-тен 5 × 107 ұяшыққа 1 мл) қосыңыз және жасушаларды толығымен қайта суспензиялау үшін қысқаша араластырыңыз немесе құйыңыз. Мұзда немесе тоңазытқышта (2–8 °C) бес минут бойы инкубациялаңыз.
