Vortexing RNA-ны кесіп тастамайды, егер сіз кездейсоқ RT орындасаңыз, оны жарамсыз етеді - тек ұзын мРНҚ-ны клондағыңыз келсе. Invitrogen техникалық қолдауы да дұрыс. Хлороформ Тризолға қарағанда ауыр және түтіктің түбіне түседі.
РНҚ құйындысы қауіпсіз бе?
Тризол лизаттарын немесе РНҚ үлгілерін қырқып алмау үшін құймаңыз. Экстракциядан кейін РНҚ үлгілерін әрқашан мұзда ұстаңыз. Бұл протокол 1,5 немесе 2 мл түтікте 1 мл Тризол лизиденген үлгілерге арналған.
РНҚ-ны қыздыра аласыз ба?
Сондықтан, жоғары температурадан ( +65°C жоғары) аулақ болыңыз, себебі бұл РНҚ тұтастығына әсер етеді. Оның орнына қайталама құрылымдарды еріту үшін денатурациялаушы буферлердің қатысуымен РНҚ-ны +65°C дейін 15 минут бойы қыздырыңыз.
РНҚ түйіршіктерін қалай қайта суспензиялауға болады?
түйіршікті жылы сумен қайта суспензиялаңыз (40-50°С). 45°С-та 10 минут бойы инкубациялаңыз. оларды 4-6 сағатқа +4 қойыңыз.
РНҚ-ны қалай тұндырасыз?
A.
Тұз концентрациясы реттеліп болғаннан кейін РНҚ 2,5 көлем этанол немесе 1 изопропанол қосып, мұқият араластыру арқылы, содан кейін -20° C температурада кемінде 15 минут салқындату.
