Егер ақуызыңыздың мөлшері антиденелеріңізбен бірдей болмаса, 0,1M глицин, pH2-3 ерітіндісімен элюциялауға болады, содан кейін SEC көмегімен антиденеден қызықты ақуызды бөлуге болады. (мысалы, superdex 200).
Белокты элюциялау дегеніміз не?
Белоктар ацетонитрил сияқты органикалық еріткіштің мөлшерінің жоғарылауының градиентімен элюцияланады. Белоктар гидрофобтылығына қарай элюцияланады. HPLC арқылы тазартудан кейін ақуыз тек ұшқыш қосылыстардан тұратын ерітіндіде болады және оңай лиофилденуі мүмкін.
Неліктен белоктардың рН элюциясы төмен?
А протеинін элюциялау үшін төмен рН буферін пайдалану өнімнің агрегациясына ықпал ететіні белгілі Дегенмен, шектеулі дәлелдер жинағы төмен рН жалғыз болмауы мүмкін екенін көрсетеді. А протеиніндегі агрегацияның себебі хроматография, керісінше, процестің басқа қырлары айтарлықтай ықпал етуі мүмкін.
Элюция қалай жасалады?
Аналитикалық және органикалық химияда элюция - еріткішпен жуу арқылы бір материалды екіншісінен алу; ұсталған иондарды кетіру үшін жүктелген ион алмастырғыш шайырларды жуудағы сияқты. … Еріткіш молекулалары талданатын затты ығыстырғаннан кейін, талданатын затты талдау үшін бағаннан шығаруға болады.
Coip үшін сізге қанша антидене қажет?
Кәдімгі Co-IP тәжірибелері үшін мен пайдаланған антидене 2ug артық емес (Менің жинағымда 2500-5000 мг антидене алу үшін 1,4 -2,0 мг антидене жеткілікті. ақуыз лизаты.) Бірақ ол әлі де үлгілеріңіздегі мақсатты ақуыздардың экспрессия деңгейлеріне байланысты, сондықтан сізге кейбір өзгертулер енгізу қажет болуы мүмкін.
How Much Protein Do You Need? Explained by Dr. Berg
