Рестрикциялық ас қорыту мақсатты ДНҚ молекуласын шектеуменферменттермен инкубациялау арқылы жүзеге асырылады - арнайы ДНҚ тізбектерін танитын және байланыстыратын және тану тізбегі ішінде немесе сыртында арнайы нуклеотидтерде ыдырайтын ферменттер тану ретінің.
Реттеу ферменттері қалай қорытылады?
Шектеу ферментінің дайджест протоколы
- Компоненттерді таза түтікке көрсетілген ретпен қосыңыз: …
- Реакцияны ас қорыту температурасында (әдетте 37 °C) 1 сағат бойы инкубациялаңыз.
- Ыстықпен инактивациялау (65 °C 15 минут) немесе 10 мМ соңғы концентрациясы ЭДТА қосу арқылы ас қорытуды тоқтатыңыз.
Реттеу ферменті ДНҚ-ны қорыта ма?
Шектеу ферменттерін ПТР өнімдерінде үйлесімді ұштарды жасау үшін де пайдалануға болады. … Барлық жағдайларда бір немесе бірнеше шектеу ферменттері ДНҚ қорыту үшін пайдаланылады, нәтижесіндеүйлесімді плазмидаға бағытсыз немесе бағытталған кірістіріледі.
ДНҚ шектеу ферменттері қалай жұмыс істейді?
Реттеу ферменттері қалай жұмыс істейді? Барлық ферменттер сияқты, шектеу ферменті пішін-пішінге сәйкес жұмыс істейді Ферменттің тану аймағы деп аталатын бөлігіне сәйкес келетін пішіні бар ДНҚ тізбегімен байланыста болғанда, ол ДНҚ-ны орап, ДНҚ молекуласының екі тізбегінің үзілуін тудырады.
Қандай фермент ДНҚ-ны қорытады?
Бұл ферменттер шектеу эндонуклеазалары немесе рестрикциялық ферменттер деп аталады және олар ДНҚ молекулаларын негіздердің белгілі бір қысқа тізбегі бар позицияларында ыдыратуға қабілетті.
